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病毒包裝 抗體定制

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病毒包裝

1. 慢病毒包裝

      慢病毒(Lentivirus)載體是在HIV-1病毒基礎上改造而成的病毒載體系統(tǒng),該載體的毒性基因已經(jīng)被剔除,可以將外源基因有效地整合到宿主染色體上,從而達到持久性表達的效果。區(qū)別于一般的逆轉錄病毒載體,它對于分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力??捎行У馗腥旧窠?jīng)元細胞、肝細胞、心肌細胞、腫瘤細胞、內(nèi)皮細胞、干細胞等多種類型的細胞,在基因治療、藥物研究等方面具有廣泛應用。

      萬類生物可進行mRNA、lncRNA、microRNA以及circRNA的干擾與過表達慢病毒包裝,嚴格把控基因設計、載體構建、慢病毒包裝的每一環(huán)節(jié),最終提供目的基因慢病毒1mL,并保證病毒滴度達到1×108TU/mL。

包裝優(yōu)勢:

(1)感染范圍廣:可有效感染分裂和非分裂的細胞,特別適合質(zhì)粒載體轉染效率低的細胞;

(2)表達時間長:可將外源基因整合到宿主細胞基因組上,實現(xiàn)目的基因長時間穩(wěn)定表達,是細胞實驗的首選;

(3)免疫原性低,安全性高。



2. 腺病毒包裝

      腺病毒(Adenovirus)是一種無包膜的線性雙鏈DNA病毒,對分裂期細胞和非分裂期細胞均具有感染能力,其復制不依賴于宿主細胞的分裂。腺病毒載體可攜帶大容量的基因片段,且感染細胞時不會整合到染色體中,安全性高,在基因治療、基礎生命科學等領域被廣泛應用。

      萬類生物可進行mRNA、lncRNA以及microRNA的干擾與過表達腺病毒包裝,以Ad5血清型E1/E3缺陷型腺病毒DNA為骨架,對克隆、包裝、擴增等各部分條件進行優(yōu)化,具有克隆陽性率高、質(zhì)量可靠、包裝穩(wěn)定、出毒迅速、滴度高等特點,病毒滴度可達1×109pfu/mL,可滿足各類實驗的需求。

包裝優(yōu)勢:

(1)宿主范圍廣:幾乎可以感染所有類型的細胞,包括分裂細胞和非分裂細胞;

(2)病毒滴度高:可產(chǎn)生滴度為1×109pfu/mL的病毒,能夠高效率感染細胞;

(3)包裝容量大:可插入大于3kb外源基因片段;

(4)感染細胞時,不整合到染色體中:不存在激活致癌基因或插入突變等危險,生物安全性高;

(5)腺病毒具有嗜上皮細胞特性:因大多數(shù)腫瘤細胞均屬于上皮細胞,這使得腺病毒非常適合應用于基因治療領域。


3. 腺相關病毒包裝

      腺相關病毒(Adeno-Associated virus,AAV)屬于微小病毒科,是一種無包膜的單鏈線狀DNA病毒,對分裂和非分裂細胞均具有感染能力。重組腺相關病毒(rAAV)是利用AAV2型基因組與不同血清型的衣殼蛋白基因組結合產(chǎn)生的混合體病毒載體,具有AAV2型的穩(wěn)定表達和基因整合能力,同時也獲得了不同血清型的組織感染嗜親性,表現(xiàn)出一定的器官靶向性。且感染溫和,免疫原性小,擴散性良好,安全性高,主要應用于動物體內(nèi)注射。

      萬類生物可進行mRNA、lncRNA以及microRNA的干擾與過表達腺相關病毒包裝,具有高滴度、高純度、高穩(wěn)定性等特點,病毒滴度可達1×1012VG/mL。

包裝優(yōu)勢:

(1)表達時間長:rAAV在細胞分裂不旺盛的組織中可持續(xù)表達3-6個月以上;

(2)特異性強:rAAV不同的血清型對不同的臟器有較高的識別及感染能力,包含中樞神經(jīng)、肌肉、心臟、肺、肝臟、眼、腦組織等,是動物實驗的首選;

(3)擴散性強:rAAV的體積小、滴度高,具有遠高于腺病毒和慢病毒的擴散性,可以穿透血腦屏障,是最理想的神經(jīng)元和膠質(zhì)細胞感染工具;

(4)宿主范圍廣:能感染分裂細胞和非分裂細胞;

(5)安全性高:迄今為止未發(fā)現(xiàn)野生型AAV對人體致病,重組AAV基因序列上去除了大部分的野生AAV基因組元件,進一步保證了安全性;

(6)免疫原性低:便于用常規(guī)的重組DNA技術進行操作,在動物實驗中局部大劑量使用極少造成非特異性反應與免疫抑制;

(7)物理性質(zhì)穩(wěn)定:在60℃不能被滅活,能抗氯仿。



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